Por diferentes mecanismos de separación existen:

• Cromatografía de adsorción

La cromatografía de adsorción es la técnica cromatográfica más antigua. Utiliza una fase móvil, ya sea líquida o gaseosa, que se adsorbe sobre la superficie de una fase sólida estacionaria.

• Cromatografía de partición

En la cromatografía de partición, los solutos se separan mediante su partición entre una fase móvil líquida y una fase estacionaria recubierta de un soporte sólido. El soporte utilizado en la cromatografía de partición suele ser sílice, pero también puede ser de otros materiales.

• Cromatografía de intercambio iónico

La cromatografía de intercambio iónico separa los componentes de una mezcla según su carga, además de su tamaño o en lugar de este. En esencia, los iones con carga positiva (cationes) o negativa (aniones) se separan utilizando diferentes fases estacionarias y fases móviles con distintos pH.

• Cromatografía de exclusión por tamaño (SEC)

La cromatografía de exclusión por tamaño (CEE) separa las moléculas según su tamaño mediante filtración a través de un gel. El gel está formado por microesferas que contienen poros con una distribución de tamaño específica. La separación se produce cuando moléculas de diferentes tamaños se incluyen o excluyen de los poros de la matriz. Las moléculas pequeñas se difunden en los poros y su flujo a través de la columna se retarda según su tamaño, mientras que las moléculas grandes no entran en los poros y se eluyen en el volumen vacío de la columna. En consecuencia, las moléculas se separan según su tamaño a medida que pasan por la columna y se eluyen en orden decreciente de peso molecular (PM).

Según los diferentes estados físicos de la fase móvil, existen:

• Cromatografía de gases

En la cromatografía de gases, la mezcla de interés se vaporiza y se transporta a través de una fase estacionaria (generalmente una columna de separación de metal o vidrio) con un gas inerte, generalmente nitrógeno o helio. Las moléculas más grandes de la mezcla tardan más en atravesar la columna y llegar al detector en el extremo opuesto.

• Cromatografía líquida

En la cromatografía líquida, la mezcla de interés se disuelve en un líquido y se pasa a través de una fase estacionaria sólida, que suele estar hecha de sílice. Existen diversas variantes de la cromatografía líquida, según la polaridad relativa de las fases móvil y estacionaria (fase normal o fase inversa) y si la fase móvil está presurizada (alta resolución).

• Cromatografía de fluidos supercríticos

En la cromatografía de fluidos supercríticos, la fase móvil es un fluido que se encuentra por encima y relativamente cerca de su temperatura y presión críticas. Si se utiliza un líquido o un gas por encima de su temperatura y presión críticas, se transforma en un fluido supercrítico. Las características de los fluidos supercríticos son intermedias entre las de los gases y los líquidos. Su menor viscosidad y alta difusividad, en comparación con un líquido, permiten una transferencia de masa más rápida entre la fase estacionaria y la fase móvil, mientras que su mayor densidad, en comparación con un gas, permite la solubilización y el transporte de los solutos a través de la columna a temperaturas más bajas.

• Electrocromatografía capilar (CEC)

En la electrocromatografía capilar, la fase móvil se desplaza a través del lecho cromatográfico mediante electroósmosis. La electrocromatografía capilar combina dos técnicas analíticas: la cromatografía líquida de alta resolución y la electroforesis capilar. La electroforesis capilar separa los analitos según su relación masa-carga mediante la aplicación de un alto voltaje a través de los extremos de un tubo capilar, que contiene el analito. En la electrocromatografía capilar, los capilares, rellenados con fase estacionaria de HPLC, se someten a un alto voltaje. La separación se logra mediante la migración electroforética de solutos y el reparto diferencial.

Por la forma del lecho cromatográfico se distinguen:

• Cromatografía en capa fina (TLC)

En la cromatografía en capa fina (TLC), la fase estacionaria es una capa delgada de material sólido, generalmente a base de sílice, y la fase móvil es un líquido en el que se disuelve la mezcla de interés. La cromatografía en capa fina ofrece la ventaja de una buena calidad fotográfica, lo que facilita la digitalización de los resultados.

• Cromatografía en columna

En la cromatografía en columna, el lecho estacionario se encuentra dentro de un tubo. Las partículas de la fase estacionaria sólida o del soporte recubierto con una fase estacionaria líquida pueden ocupar todo el volumen interior del tubo (columna de relleno) o concentrarse en la pared interna del tubo, dejando un paso libre para la fase móvil en la parte central (columna tubular abierta). Las diferencias en la velocidad de movimiento a través del medio se calculan según los diferentes tiempos de retención de la muestra.

• Cromatografía en papel

La cromatografía en papel consiste en colocar un pequeño punto o línea de solución de muestra sobre una tira de papel cromatográfico. El papel se coloca en un recipiente con una capa fina de disolvente y se sella. A medida que el disolvente asciende por el papel, se encuentra con la mezcla de muestra, que comienza a ascender por el papel junto con el disolvente. Este papel está hecho de celulosa, una sustancia polar, y los compuestos de la mezcla alcanzan mayores distancias si son menos polares. Las sustancias más polares se unen al papel de celulosa con mayor rapidez y, por lo tanto, no alcanzan mayores distancias.

Elección de métodos de cromatografía

Entre todos los métodos cromatográficos para separar compuestos, la elección del método reside en las características fisicoquímicas de la molécula a separar. Las fases sólidas empleadas para la cromatografía, también llamadas medios cromatográficos, son soportes porosos inertes y pueden funcionalizarse con diversos grupos químicos para determinar las interacciones con las moléculas a separar.

En la práctica, la elección sensata de la fase sólida o material de relleno adecuado es fundamental en la cromatografía, ya que desempeña un papel fundamental en los resultados y la eficiencia del proceso de extracción y purificación. El gel de sílice es uno de los materiales de relleno más versátiles y eficaces en cromatografía, y también uno de los más populares y ampliamente utilizados en campos como la biomedicina moderna, las ciencias de la vida, la química fina, la química analítica, la química orgánica, la bioquímica, la seguridad alimentaria, la extracción de plantas, el análisis científico, la monitorización ambiental, la petroquímica, etc.

El gel de sílice es un absorbente polar con una ligera acidez. Absorbe los componentes de una mezcla y, al mismo tiempo, mantiene su neutralidad y estructura durante el proceso. El material de relleno a base de sílice también presenta una alta resistencia mecánica y soporta altas presiones y velocidades. El material de relleno a base de sílice producido por Qingdao Bangkai, desarrollado recientemente por su centro de I+D, presenta mayor pureza, menor contenido metálico, está unido a múltiples grupos funcionales y ofrece mayor reproducibilidad y capacidad de carga. Uno de los nuevos materiales de relleno a base de sílice desarrollados por Bangkai ha sido validado con éxito para su uso en productos electroópticos. Se puede personalizar a petición y es la opción ideal para mejorar los procesos de separación y purificación y reemplazar productos similares en el mercado internacional.

Referencia: WIKIPEDIA

https://en.wikipedia.org/wiki/Chromatography