Hashtag: Cosas que debes saber sobre los endcapping
¿Qué es el endcapping?
Cuando la fase estacionaria a base de sílice se une con grupos funcionales, es imposible alcanzar todos los grupos silanol debido al impedimento estérico y otros factores. Los grupos silanol que quedan se denominan grupos silanol residuales y, por lo general, causan colas de pico de compuestos básicos y deben sililarse. Este proceso de sililación se denomina recubrimiento final y tiene como objetivo reducir la actividad del silanol.
¿Qué es el doble recubrimiento?
El doble encapsulado significa que se encapsula dos veces. Al aplicar un encapsulado doble (o triple), las interacciones de silanol se pueden minimizar aún más y se puede mejorar la estabilidad a un pH medio. Es difícil eliminar todos los grupos de silanol residuales incluso con encapsulado. No es un proceso 100% seguro y siempre hay una pequeña cantidad de silanoles que aún permanecen en la superficie. Sin embargo, a menudo no son reactivos debido al impedimento estérico del agente de encapsulado y los grupos funcionales. Muchos fabricantes optan por aplicar múltiples encapsulados para minimizar la actividad del silanol al máximo.
¿Por qué las columnas HPLC de fase inversa tienen un recubrimiento final?
La desactivación de extremos se utiliza con mayor frecuencia en columnas HPLC de fase reversa. La desactivación de extremos de la columna HPLC minimiza la interacción del silanol al reducir el grupo silanol residual. Protege el soporte de sílice de la disolución y también reduce la adsorción no deseada de compuestos básicos o iónicos. Existen diferentes procedimientos de desactivación de extremos en las fases de columna de HPLC modernas. El siguiente gráfico muestra la diferencia entre la unión de fase estacionaria tradicional y la desactivación de extremos con TMS. Reacción:
¿Cuál es la diferencia entre las columnas HPLC de fase inversa normales y las columnas con protección terminal?
Al fabricar columnas de fase reversa, es común utilizar sílice para reaccionar con un silano que contiene una cadena lateral de alcano. Si el alcano es demasiado grande, se puede evitar que reaccione con algunos de los grupos silanol en la superficie de la sílice. Estos materiales se denominan no encapsulados. Los silanol que quedan sin reaccionar se pueden hacer reaccionar en el futuro mediante encapsulado con un silano que contiene un pequeño grupo alquilo. Estos productos se denominan encapsulados.
Se han desarrollado algunas aplicaciones con materiales sin protección terminal, y estos deben utilizarse para reproducir esos resultados. En el caso de los materiales con protección terminal, los especialistas en marketing pueden decirle que hay protección terminal total o doble, pero que aún quedan grupos SiOH en la superficie. Para una separación de línea base, estos grupos SiOH libres son necesarios para algunos compuestos. Además, aunque para la mayoría de las aplicaciones los materiales con protección terminal son mejores, hay casos en los que los materiales sin protección terminal funcionan mejor. Por ejemplo, cuando se separa el ácido tartárico del ácido quínico en el jugo de frutas. Se puede separar hasta la línea base de forma isocrática utilizando una columna C-18 sin protección terminal, pero pocas columnas con protección terminal están preparadas para ello.
¿Cuáles son los beneficios del Endcapping?
• La interacción no deseada de analitos polares o cargados (ácidos, bases, etc.) se reduce porque se minimiza la cantidad de grupos silanol disponibles.
• Los materiales con tapa en los extremos tienen una mayor carga de carbono en la superficie.
• Se puede minimizar la cola de pico, lo que da como resultado una mejor forma de pico.
• Las interacciones de silanol minimizadas en la columna con doble protección reducen la retención.
• Cuando se utiliza en condiciones adversas (por ejemplo, pH extremo), el recubrimiento final ayuda a evitar que la superficie de la sílice funcionalizada sea atacada e hidrolizada.
¿Cuándo elegir columnas con o sin remates en los extremos?
Para prolongar la vida útil de la columna, asegúrese de que el pH del método esté dentro del rango recomendado por la fase unida.
En general, las columnas HPLC con desactivación de extremos son una buena opción para los métodos de pH de rango medio. A medida que aumenta el pH, la disolución de sílice disminuye debido a la desactivación de extremos.
Las columnas HPLC sin protección terminal son una buena opción para métodos de pH bajo.