Como sabemos, una de las especificaciones del gel de sílice C18 es la carga de carbono. ¿Por qué la carga de carbono afectará a la columna HPLC? Para el mismo tipo de columna, cuanto mayor sea el contenido de carbono, mayor será el contenido de carbono unido, lo que también significa una mayor capacidad de carga y de soporte.
La columna C8 es una columna que se utiliza para la cromatografía de fase inversa. Normalmente, la cromatografía de fase inversa utiliza una fase estacionaria hidrófoba. Sin embargo, las fases estacionarias o columnas de soporte sólido contienen sílice modificada. En este caso, la sílice es una fase estacionaria hidrófila. Además, contiene grupos alquilo que están unidos covalentemente a la sílice para formar una fase estacionaria de sílice hidrófoba. Mientras tanto, la fase móvil de la cromatografía de fase inversa es la fase acuosa. Por lo tanto, la inmovilización tiene una alta afinidad por los compuestos no polares de la muestra.
En particular, la columna C8 contiene una cadena de carbono octilo con ocho carbonos como grupos alquilo, que se utilizan para modificar la columna de sílice. Además, estas cadenas de carbono son relativamente cortas. Por lo tanto, esta brevedad reduce la hidrofobicidad y la densidad de la fase estacionaria. Por lo tanto, los compuestos no polares tienen tiempos de retención más cortos y menos separación en la columna C8.
Las columnas C18 son el tipo de columna menos costoso y común en la cromatografía de fase reversa. Además, el tipo de grupo alquilo utilizado en la modificación es una cadena de carbono octadecilo en la columna C18. Por el contrario, tiene una cadena de carbono más larga. Además, la densidad de la columna en la columna C18 es mayor debido al mayor número de carbonos en el grupo alquilo. Por lo tanto, la hidrofobicidad de la columna C18 también es alta. Por lo tanto, permite tiempos de retención más prolongados para compuestos no polares, lo que da como resultado mejores separaciones. Además, reduce la formación de manchas en las curvas de separación.
Además, las columnas C18 son mejores para separar compuestos más hidrófobos, como los ácidos grasos de cadena larga. Por el contrario, las columnas C8 son más adecuadas para la separación de compuestos orgánicos pequeños.
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