Como sabemos, una especificación del gel de sílice C18 es la carga de carbono. ¿Por qué la carga de carbono afecta a la columna HPLC? Para el mismo tipo de columna, un mayor contenido de carbono significa una mayor unión de carbono, lo que también implica una mayor capacidad de soporte y carga.

La columna C8 se utiliza en cromatografía de fase inversa. Normalmente, esta técnica emplea una fase estacionaria hidrofóbica. Sin embargo, las fases estacionarias o columnas de soporte sólido contienen sílice modificada. Aquí, la sílice actúa como fase estacionaria hidrofílica, además de incluir grupos alquilo unidos covalentemente para formar una fase estacionaria de sílice hidrofóbica. Por otro lado, la fase móvil en cromatografía de fase inversa es acuosa. Por lo tanto, la inmovilización tiene alta afinidad por compuestos no polares en la muestra.

En particular, la columna C8 contiene una cadena de carbono octilo con ocho átomos de carbono como grupos alquilo, que modifican la columna de sílice. Estas cadenas de carbono son relativamente cortas, lo que reduce la hidrofobicidad y densidad de la fase estacionaria. Como resultado, los compuestos no polares tienen tiempos de retención más cortos y menor separación en la columna C8.

Las columnas C18 son más económicas y comunes en cromatografía de fase inversa. El grupo alquilo utilizado en su modificación es una cadena de carbono octadecilo, que es más larga. Además, la densidad de la columna C18 es mayor debido al mayor número de átomos de carbono en el grupo alquilo, lo que incrementa su hidrofobicidad. Esto permite mayores tiempos de retención para compuestos no polares, mejorando la separación y reduciendo el ensanchamiento de las curvas.

Además, las columnas C18 son más efectivas para separar compuestos altamente hidrofóbicos, como ácidos grasos de cadena larga, mientras que las C8 son más adecuadas para compuestos orgánicos pequeños.

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